1、为什么要用四单位病毒经过大量的试验数据显示，只有四单位的病毒抗原浓度才能最好的反应血清抗体的水平，四单位是人为规定的。
2、试验前准备准备好配制四单位抗原所需的所有材料，包括病毒抗原、PBS缓冲液、1%鸡红细胞、单道和多道移液器及吸头、20ml青瓶及塞子、96孔微量血凝板等。
3、测定病毒的血凝滴度（HA试验）如何测定病毒的血凝滴度，详见本小编的百度经验“血凝（H钽吟篑瑜A）试验操作攻略”一文。假设测得的血凝滴度为2的8次方，则四单位病毒的稀释倍数为2的6次方（2的8次方除以4），即64倍稀释。
4、计算抗原用量根据所需的四单位抗原的总量来确定抗原液的用量。比如，需四撮劝丛食单位抗原总量为20ml，则利用公式：抗原原液*64（稀释倍数）=20ml，求出抗原原液的体积为0.312ml，需要PBS缓冲液的体积约19.7ml，根据计算的结果配置即可。
5、配制四单位抗原取PBS缓冲液19.7ml，加入20ml的小青瓶中，取0.312ml的病毒抗原液，加入到缓冲液中，盖上塞子，充分混匀，最好用涡旋仪混匀，至此，四单位抗原配制完成。
6、使用四单位抗原是进行HI试验必须的，使用前还要进行四单位的验证，验证成功后就可以用了。