1、病人取侧卧位，其背部和床面垂直，头颈向前屈曲，屈髋抱膝，使腰椎后凸，椎间增宽，以利进针。
2、定穿刺点：通常选用腰椎3--4间隙，并做好标记。
3、在穿刺点用2%普鲁卡因做局部麻醉
4、术者用左手拇指紧按住两个棘突间隙的皮肤凹陷，右手持穿刺针，与穿刺点刺入皮下，使针垂直于脊背平面或略向头端倾斜并缓慢推进，当感到阻力突然减低时，针已穿过硬脊膜，再进少许即可。成人进针深度4--6cm。
5、拔出针心，可见脑脊液滴出。接测压表，让病人双腿慢慢伸直，可见脑脊液在测压表内随呼吸波动，记录脑脊液压力。取下测压表，用无菌试管接脑脊液2--4ml，送化验室检查。
6、插入针心，拔出穿刺针。穿刺点以碘酒消毒后盖以消毒纱布，用胶布固定。