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用纤维素酶降解香蕉茎干制备葡萄糖工艺条件研究

时间:2024-11-13 09:09:07

1、样品预准备(1)用烧杯取一定量的香焦茎干粉放到60℃干燥箱干燥备用(注:以免吸湿犬匮渝扮)。(2)用电子天平称取1克纤维素酶,在用200ml的容量瓶配制纤维素酶溶液,放到电冰箱冷藏备用(注:冷藏的酶溶液最多只能用两天)。

用纤维素酶降解香蕉茎干制备葡萄糖工艺条件研究

2、水润浸泡每次用500ml或300ml的烧杯称取1克的香蕉茎干粉倒入20ml水浸泡到30min以上才进行单因素或正交酶解反应。

3、调节参数浸泡时间到,按所需的各单因素参数调节。(1)时间分别为30min,40min,50min,1h,1.5h,2h,2.5h,3h单因素下。PH值为7.10,反应温度55℃,酶用量10%,料液比1:80g:ml。(2)温度分别为35℃,40℃,45℃,50℃,55℃,60℃,65℃,70℃,75℃单因素下。PH值为7.10,反应时间1h,酶用量10%,料液比1:60g:ml。(3)料液比分别为1:100g:ml,1:90g:ml,1:80g:ml,1:70g:ml,1:60g:ml,1:50g:ml,1:40g:ml单因素下。PH值为5.00,反应时间1.5h,酶用量10%,反应温度45℃。(4)加酶量分别为12.5%,10%,7.5%,5%,2.5%单因素下。PH值为5.00,反应时间1.5h,料液比1:70g:ml,反应温度45℃。(5)PH值分别为4.00,4.50,5.00,5.50,6.00,6.50,7.00单因素下。反应时间1.5h,料液比1:50g:ml,酶用量10%,反应温度45℃。

4、酶解将调好参数的香蕉茎干粉液用恒温磁力搅拌器进行酶解反应一定时间。

5、抽滤等酶解反应时间到,用循环水式多用真空泵两次抽滤,第一次抽滤用滤布过滤,并用自来水润洗两次滤渣。第二次抽滤用滤纸。最后滤渣用表面皿回收放到干燥箱。

6、浓缩将抽滤好的滤液用旋转蒸发器浓缩至小于5ml。浓缩好的滤液用注射器经过0.45μm滤膜转移入样品瓶,贴上标签。

7、液相色谱仪检测用液相色谱仪检测样品中葡萄糖的含量,先打个葡萄糖标准样,因此可知葡萄糖出峰时间在5.0min左右,可知第二个峰是葡萄糖的峰,在记录其峰高(如图2-2所示)。

用纤维素酶降解香蕉茎干制备葡萄糖工艺条件研究

8、葡萄滇筲贞珍糖产量的计算根据其峰高、浓缩体积、浓缩液中葡萄糖的浓度等之间的关系,来计算出葡萄糖的产量。Y=3313.9X+12430(Y为峰高,X为浓缩液中葡萄糖的浓度)[12],产匪犬挚驰量=X*V(V浓缩的体积)。

9、最佳因素的确定由调节参数部分知道,先固定其中四个单因素,然后在改变一个单因素,最后通过高效液相色谱检测,求出葡萄糖的产量,从而确定较佳单因素PH值,温度,时间,料液比,酶用量。

10、正交实验从单因素的实验中,得到较好的单因素条件,在运用L16(45)进行正交实验,找出纤维素酶降解香蕉茎干制备葡萄糖最佳工艺条件。

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