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AsA和DHA测定方法

时间:2024-10-13 07:15:59

1、0.3g样品用5%偏磷酸(或5%TCA 三氯酸)2ml 研磨,15000g离心20min,上清液用于测定

2、AsA的测定:0.2ml上清液+0.2ml 150Mm PBS(PH=7.4)+0.2ml 水

3、DHA+AsA 的测定:0.2ml 上清液+0.2ml 150 mMPBS(PH7.4)+0.1ml 10mm DTT 涡旋,室温放置15min,之后加入0.1 ml 0.5%(w/v)N-乙基顺丁烯二酰亚胺

4、将由2、3 得到的溶液分别涡旋,室温放置>30s

5、分别向经4 处理的混合液中各加入0.4ml 10% (u/v)TCA,0.4ml44%(v/v)H3PO4,0.4 ml Dipyridgl in 70%(v/V)ethanol 和0.2ml 3%(w/v)Fecl3,涡旋,37℃放置60 min

6、测A525

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