1、一．适应范围：本法适用配合饲料和单一饲料。二．原理：将试样中有机物破坏钙变成溶于水的离子，用三乙醇胺乙二胺盐酸羟胺和淀粉溶液消除干扰离子的影响。在碱性溶液中以钙黄素为指示剂，用乙二胺四乙酸二钠（EDTA）标准滴定溶液络合滴定钙，以EDTA溶液消耗的体积即为钙的含量。三．试剂和溶液：本标准中所用试剂除特殊要求外，均为分析纯。试验用水应为蒸馏水或等纯度水。1.硝酸2.高氯酸3.盐酸羟胺4.盐酸溶液（1：3）溶液5.氢氧化钾水溶液20%6.三乙醇胺水溶液（1：1）7.乙二胺水溶液（1：1）8.淀粉溶液(10g/L):称取1g可溶性淀粉加入200ml,加5ml水润湿，加95ml沸水搅匀煮沸现用现配。9.孔雀石绿水溶液：1g/l10.钙黄素-甲基百里香酚蓝指示剂：0.1g钙黄绿素和0.12g甲基百里香酚蓝，5g氯化钾研细摇匀。贮存于磨口瓶中备用。四．仪器与设备：1.实验室用样品粉碎机或研钵。2.分样筛：孔径0.45mm（40目）。3.分析天平：分度值0.0001g。4.高温炉：可控制炉温在550±20℃。5.坩埚：瓷质，容积50ml。6.凯式烧瓶：150ml。7.可调小电炉：1000W。8.容量瓶：100ml.9.滴定管：酸式25ml。10.移液管：1ml.11.量杯：10ml;20ml.12.锥形瓶：150ml。五．试样的选取和制备：取具有代表性试样，用四分法缩减至50g，粉碎至40目。六．测定步骤：1.试样的分解：⑴．干法：用于有机物质。称取2.5g试样，准确至0.0002g，在电炉上小火炭化，在炭化过程中，应将试样在较低温度状态加热灼烧至无烟，然后升温灼烧至样品无炭粒，再放入高温炉中于550±20℃下灼烧3小时，取出，在空气中冷却后，加入1：3的盐酸10ml和浓硝酸4滴，小火煮沸，将此溶液转入容量瓶，定容，即为试样分解液。⑵．湿法：用于无机物质。称取磷酸氢钙0.4g，其它试样称取1.0g于凯式烧瓶中，精确至0.0002g，加入浓硝酸10ml、高氯酸10ml，盖上弯颈漏斗，加热煮沸10min，冷却后加蒸馏水20ml，煮沸5min，驱逐二氧化氮，冷却后转入容量瓶，用蒸馏水定容至刻度，摇匀，即为试样分解液。2.试样的测定：准确移取试样分解液1ml于锥形瓶中，加水50ml，加淀粉溶解液10ml，三乙醇胺2ml，乙二胺1ml，1滴孔雀石绿，氢氧化钾10ml，0.1g盐酸羟胺，加钙黄绿素少许，在黑色背景下立即用EDTA标准液滴定至绿色荧光消失呈现紫红色为滴定终点。七．测定结果计算与表达：1.计算：Ca（%）=T×(V₂－V₁)×100/m式中：T—EDTA标准滴定溶液对钙的滴定度，g/ml;V₁--滴定空白时所用标准液的体积（ml）；V₂--试样实际消耗EDTA标准滴定溶液的体积（ml）；m—试样的质量（g）。2.重复性：每个试样取两个平行样进行测定，以其算术平均值为结果。含钙量在5%以上时，允许相对偏差3%；含钙量1%-5%时，允许相对偏差5%；含钙量1%以下时，允许相对偏差10%。