1、首先,将 pE试剂在大肠杆菌中进行离心,然后得到IPTG诱导后,对收集的菌体超声破碎,得到上清液和沉淀分别进行电泳。
2、然后,在菌体破碎后的沉淀寻找蛋白条带,而在上清液中无蛋白条带,可以确定Namp蛋白主要以包涵体的形式存在。
3、然后,将尿素通过洗涤得到纯化的蛋白,再用SDS-PAGE电泳检测后发现,蛋白条带单一无其他杂带,纯化效果较好。
4、然后,使用BCA蛋白定量试剂盒进行测定并纯化,测得纯化后蛋白浓度为2.58mg/mL。
5、然后,进行对比检测草鱼Nramp的基因,然后在胚胎发育的不同阶段,以及健康成鱼不同组织。
6、最后,在人和小鼠及其他哺乳动物的抗扭箧别砷细胞中的病原菌进行Nrampl基因侵染,在侵染方面起着非常重要的作用,与动物体的免疫力和抗病性密切相关。