western-blot过程中的常见问题及解决方案
1.两块玻璃板之间灌胶，胶总是不平
1、解决对策：玻璃没有洗干净，应该洗得很干净过硫酸铵和TEMED加量相对较多加完试剂后应摇匀
2.总是漏胶
1、解决对策：避免玻璃边缘（与胶条接触处）破损将两块玻璃板摆放对齐，底部处于同一平面操作时将气泡完全排除
3.膜上有明显气泡
1、解决对策：操作时将气泡完全排除靠膜一侧的滤纸应铺平
4.特异性低
1、解决对策：优化一抗提高一抗和二抗的稀释度降低SDS-PAGE中蛋白的上样量
5.背景高
1、解决对策：优化封闭液优化洗涤缓冲液，增加洗涤次数减少曝光时间
6.信号低
1、解决对策：优化一抗浓缩样品选择更高灵敏度的发光液，如enlight等。