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姐妹染色单体分化染色实验

时间:2024-10-23 23:06:43

1、Brdu掺入:细胞培养24h后于培养液中加入Brdu,最终浓度10μg/ml,避光条件下继续培养;

2、待细胞经历两个细胞周期(48h),培养终止前4h加秋水仙素,秋水仙素终浓度为0.02μg/ml培养液;

3、常规制片,染色体制片在37℃恒温箱内老化24h;

4、紫外灯照射:取标本玻片置于大号培养皿内,正面朝上,上覆盖胲壅克运镜头纸,从玻片外镜头纸边沿加2×SSC液致使全镜头纸浸湿,移入60℃水浴锅内,紫外线灯距离5cm,照射30min;

5、染色:取出照射后标本,蒸馏水冲洗,置pH6.8的2%Giemsa染色10min。

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