1、在组织冻存管上记录清楚肿瘤组织的相关信息；
2、水浴加热并维持玻璃化液 1、玻璃化液 2 为 26℃； 注意：在后续使用玻璃化液 1、玻璃化液 2 时，维持液温为 26℃，有利于提高组织复苏后 的存活率。
3、在 100mm 培养皿中，用生理盐水清洗肿瘤组织，使用眼科剪、眼科镊修剪 去除血管、包膜以及坏死组织；
4、使用组织处理模具将肿瘤组织切成 1mm 厚的薄片； 注意：经验证，组织切片的最佳厚度为 1mm。
5、在 100mm 培养皿中，用生理盐水再次清洗切好的组织，并用无菌纱布吸除 组织表面的液体；
6、使用平口镊将肿瘤组织切片浸入 V1 管中的 10ml 玻璃化液 1 中，26℃， 25min ；
7、将 V1 管中的液体及组织切片全部倒入 100mm 培养皿中，在移入 V2 管前使 用无菌纱布尽量将组织表面的玻璃化液 1 吸除； 注意：尽量减少组织切片从玻璃化液 1 移入玻璃化液 2 之间的操作时间。
8、使用平口镊将组织切片移入 V2 管中的 10ml 玻璃化液 2 中，26℃， 15min 或 者饶主碌妒待组织切片自然沉降至管底； 注意：如果组织切渔镭沃昏片在 15min 内没有自然沉降至 V2 管的管底，等待至其沉至管底；如果组织切片早于 15min 沉至管底，让组织切片在 V2 管内浸泡至少 15min。
9、将组织切片平铺摆放于组织支架上；
10、将组织支架平放于无菌纱布上，尽量吸除组织切片表面的液体；
11、使用有齿镊将组织支架快速浸入无菌液氮，时间不少于 5min；
12、快速将组织支架移入组织冻存管内，旋紧冻存管，将冻存管移入液氮罐中保 存。 注意：在组织支架移入组织冻存管前，检查组织切片是否透明，透明的组织切片意味着组 织切片成功被玻璃化。